**معلومات تم جمعها من الإنترنت
يعد عمر العمود الكروماتوغرافي مصدر قلق كبير، حيث يرتبط مباشرة بالتكاليف. ما هي العوامل التي تؤثر على مدة خدمة العمود؟ وهل هناك طرق لإطالة هذا العمر؟
العوامل المساهمة المحتملة
① الظروف الكروماتوغرافية متطرفة نسبيًا
② العمود يظهر تحملًا ضعيفًا
③ العينة ملوثة نسبيًا
④ لم يتم اتخاذ أي تدابير وقائية
1. الظروف الكروماتوغرافية متطرفة نسبيًا
تعتبر الظروف الكروماتوغرافية متطرفة عندما:
① درجة حموضة الطور المتحرك متطرفة للغاية؛
② تركيز ملح العازل في الطور المتحرك مرتفع بشكل مفرط؛
③ ضغط العمود مرتفع بشكل مفرط؛
④ درجة حرارة العمود مرتفعة بشكل مفرط.
1. الأعمدة القياسية القائمة على السيليكا تتحمل عادةً قيم الأس الهيدروجيني بين 2 و 6. أقل من الأس الهيدروجيني 2، قد تتحلل المرحلة المرتبطة وتنفصل؛ أعلى من الأس الهيدروجيني 7، قد يذوب حشو السيليكا ويتسرب.
الحل: لمتطلبات الأس الهيدروجيني القصوى، استخدم أعمدة هجينة عضوية ذات تحمل واسع للأس الهيدروجيني.
2. تركيز مرتفع بشكل مفرط لأملاح المخزن المؤقت في الطور المتحرك:
① قد تكون الشوائب الميكانيكية في أملاح المخزن المؤقت مرتفعة أيضًا؛ يلزم ترشيح الأغشية لأملاح المخزن المؤقت.
② عند تركيزات عالية من الأملاح في المخزن المؤقت، قد يتسبب التناسب المفرط للطور العضوي في التدرجات في ترسب الأملاح، مما يؤدي إلى انسداد الخلاطات والحاقنات والأعمدة والأنابيب.
الحل: تجنب التناسب المفرط للطور العضوي، أو أضف 20% ماء إلى الطور العضوي.
3. ضغط عمود مرتفع بسبب لزوجة الطور المتحرك العالية:
المذيبات عالية اللزوجة: مثل الأيزوبروبانول، الإيثانول، الديوكسان، مخاليط الميثانول والماء
الحل: 1) التبديل إلى طور متحرك أقل لزوجة؛ 2) تقليل معدل التدفق؛ 3) زيادة درجة حرارة العمود بشكل مناسب؛
4. توصي الشركات المصنعة عمومًا بدرجات حرارة العمود الأقل من 50 درجة مئوية، حيث قد يؤدي الحرارة الزائدة إلى تقصير عمر العمود.
الحل: استخدم أعمدة هجينة عضوية لتحسين تحمل الحرارة.
2. مشاكل تحمل العمود
1. تُظهر الأعمدة الهجينة العضوية، كما ذكرنا سابقًا، تحملًا فائقًا لتقلبات درجة الحموضة ودرجة الحرارة البيئية.
2. الهياكل المسامية الدقيقة داخل مصفوفات السيليكا، تشبه الشقوق السنية، تسبب بسهولة احتجاز العينة أو الامتصاص الميت.
الحل: استخدام تقنيات متخصصة لتقليل المسامية الدقيقة يطيل عمر العمود بشكل كبير.
3. الأعمدة ذات حجم الجسيمات الأصغر أكثر عرضة لارتفاع ضغط العمود
الحل: استخدم أعمدة القشرة الصلبة عالية الكفاءة. تُظهر أعمدة القشرة الصلبة ذات حجم الجسيمات الأكبر انخفاضًا طفيفًا في الكفاءة مع توفير تحمل أكبر لزيادات الضغط الناتجة عن التلوث.
3. العينة متسخة
يجب أن نفهم أصل العينة - سواء كانت مستخلص منتج طبيعي، عينة بيولوجية، منتج تخمير، أو مركب صناعي. بالنسبة لمستخلصات المنتجات الطبيعية، تتضمن أعمالنا التحضيرية إثراء المركب المستهدف بناءً على خصائصه مع إزالة الملوثات مثل الأصباغ التي قد تلوث العمود. بالنسبة للعينات البيولوجية - التي قد تأتي من الأنسجة، الدم، إلخ.
يجب علينا إزالة المكونات التي تسبب تلوث العمود مثل الفوسفوليبيدات والبروتينات مع إثراء المكونات المستهدفة قليلة الوفرة. بالنسبة لمنتجات التخمير، يجب إزالة العناصر الغذائية مثل السكريات في مرق التخمير والمكونات من الخلايا الميكروبية المتحللة، بينما يتم إثراء المكونات المستهدفة ذات التركيز المنخفض. بالنسبة للمنتجات الاصطناعية، يجب علينا تحديد المكونات المتبقية والمنتجات الثانوية والمواد الخام الزائدة في محلول التفاعل، وإزالة المكونات التي تلوث العمود بشكل مناسب.
الحلول: ① استخدام طرق استخراج المذيبات أو طرق الترسيب لإزالة الشوائب أو إثراء المركبات المستهدفة؛ ② بالنسبة لحجوم العينات الصغيرة، استخدم استخراج الطور الصلب (SPE) لتحضير العينة؛ ③ بالنسبة لحجوم العينات الكبيرة، استخدم أعمدة كبيرة الحجم لامتصاص الشوائب أو إثراء المركبات المستهدفة.
4. حماية مقدمة العمود
مصادر تلوث العمود: ① تنشأ من العينة؛ ② تنشأ من الطور المتحرك.
الحلول: 1) قم بتركيب فلتر عبر الإنترنت قبل الحقن لمنع الملوثات الموجودة في الطور المتحرك من دخول العمود؛
2) ضع عمود حماية قبل العمود الرئيسي لمنع الملوثات مثل المواد ذات الاحتفاظ القوي في العينة من دخول العمود، مع توفير حماية ثانوية ضد الملوثات في الطور المتحرك.