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色谱柱的样品载量一般是指制备柱的样品载量。影响色谱柱样品载量的因素有哪些?样品载量不同可能带来哪些不同的结果?
1. 取决于填料的参数
① 填料的孔径越大,其比表面积越小,导致键合的固定相越少,样品吸附位点越少,因此样品负载能力越低;
② 键合密度越大,可用的吸附位点越多,导致样品负载能力越高;
③ 全多孔填料的样品负载能力高于核壳填料(因为核壳填料的实心核占据了部分比表面积)。
注意:这与碳含量没有直接关系。例如,C18 的碳含量高于 C8,但这仅仅表示碳链更长,疏水性更强。吸附位点数量或键合密度不一定随之变化。
对于相同的键合相——例如两者都是 C18 键合相——较高的碳含量与键合密度和样品负载能力呈正相关。
2. 与柱规格相关
柱尺寸越大,填充材料的数量越多,样品负载能力越高。
3. 与色谱柱和流动相的选择性相关
4. 与柱效相关
① 填料粒径越小,柱效越高,分离度越大,样品载量越大;
② 柱长越长,柱效越高,分离度越大,样品载量越大。
5. 与样品分离的难易程度相关
杂质若分离度低且含量高,则会干扰目标化合物的分离,显著影响柱的样品载量。