液相色谱仪器的20条不成文规则

**作者：吕晓悦女士原创 | HAMAG

液相色谱仪看起来坚固，但实际上相当精密。许多故障并非源于“磨损”，而是“误用”——我们习以为常的某些操作习惯，正在悄悄缩短仪器的使用寿命。以下20条“不成文规则”中的每一条，都是前人用惨痛教训换来的经验。

1. 流动相必须过滤——使用0.22 μm或0.45 μm滤膜；否则无异于磨损泵。

2. 在水相中测量pH值——在加入有机相之前进行调整，因为有机相会干扰电极读数。

3. 在正确的pH范围内使用缓冲盐——每种盐只在特定的pH范围内有效；使用不当只会浪费时间。

4. 仅靠超声脱气是不够的——需与真空脱气机配合使用，否则气泡会让你怀疑人生。

5. 不要从0%有机相开始梯度洗脱——盐析出和气泡的风险极高，尤其要注意磷酸盐。（仅适用于含盐体系。）

6. 绝不能让流动相跑干——泵干转会直接磨损柱塞和密封圈，而泵的维修费用非常昂贵。

7. 使用含盐流动相后立即冲洗——先用纯水，再用甲醇；盐晶体会像百洁布一样磨损泵。

8. 保持温和的流速并进行温和的进样——突然的变化会冲击柱床，对填料造成不可逆的损伤。

9. 使用新柱前，检查储存溶液与流动相是否互溶——若不互溶，立即弃用该柱。

10. 使用盐前后，柱子必须用过渡相冲洗——用10%甲醇/水冲洗10个柱体积；跳过此步骤会毁掉柱子。

11. 不要随意反冲柱子——除非手册明确允许，否则会导致柱效急剧下降。

12. 必须安装保护柱——小投入，长远省大钱；污染时及时更换。

13. 色谱柱不能干燥——不使用的色谱柱，两端必须拧紧堵头；如果干燥，会导致堵塞。

14. 样品必须过滤——所有含颗粒的样品都要过滤；多糖和蛋白质使用0.22 μm亲水性PTFE滤膜。

15. 样品溶剂必须与流动相兼容——过强的洗脱能力会导致溶剂效应，造成峰形不良。

16. 梯度洗脱前务必先运行空白——否则，杂质峰会伪装成样品峰，导致所有数据失效。

17. 定量方法中也要评估杂质干扰——不要想当然；否则在稳定性测试时会让你追悔莫及。

18. 方法转移时，注意仪器死体积的差异——同一方法在不同仪器上可能产生截然不同的结果。

19. 每天用感官“检查”仪器——倾听异常声响，观察气泡，感受泄漏；早发现才能早解决。

20. 只使用色谱级试剂——分析级试剂中的杂质会让你在追逐幽灵峰时陷入绝望。