**लेखक: इंटरनेट से मूल
क्या आपके प्रिपेरेटिव लिक्विड क्रोमैटोग्राफ में दबाव पहले की तुलना में अचानक काफी बढ़ गया है? कारण नहीं मिल रहा है? निम्नलिखित तरीके आपको समस्या निवारण में मदद कर सकते हैं!
लिक्विड क्रोमैटोग्राफी में रुकावट के संभावित बिंदु: ऑनलाइन फिल्टर, पर्ज वाल्व इंसर्ट, इंजेक्टर नीडल होल्डर, कॉलम, कॉलम ओवन और फ्लो सेल। यदि दबाव बहुत अधिक हो जाता है, तो आपको दबाव कम करने के लिए तुरंत पर्ज वाल्व खोलना चाहिए, फिर प्रत्येक घटक की बारी-बारी से जांच करने से पहले पर्ज वाल्व को फिर से बंद कर देना चाहिए।
एक, क्रोमैटोग्राफिक कॉलम को हटा दें और दबाव में बदलाव का निरीक्षण करने के लिए प्रवाह दर को धीरे-धीरे बढ़ाएं।
I. यदि क्रोमैटोग्राफिक कॉलम को हटाने के बाद कोई दबाव न हो, तो यह इंगित करता है कि रुकावट कॉलम या फ्लो सेल में है:
1. क्रोमैटोग्राफिक कॉलम के अगले सिरे को कनेक्ट करें और पिछले सिरे को डिस्कनेक्ट करें।
①. यदि दबाव अधिक है, तो यह कॉलम के अगले सिरे पर रुकावट का संकेत देता है। इस कॉलम के साथ हाल ही में उपयोग किए गए मोबाइल चरण (लवण अवक्षेपण; उच्च-जल-चरण अनुपात का उपयोग करें और कम प्रवाह दर पर फ्लश करने के लिए कॉलम तापमान बढ़ाएं) और विश्लेषण किए जा रहे नमूने की घुलनशीलता (यदि नमूने में घुलनशीलता कम है और अवक्षेपित हो गया है, तो डिटेक्टर को कनेक्ट किए बिना कम प्रवाह दर पर अत्यधिक घुलनशील विलायक के साथ बैकफ्लश करें) की जांच करें;
②. कम चिपचिपापन वाले मोबाइल चरण में स्विच करने पर विचार करें (आप कॉलम तापमान को थोड़ा बढ़ा सकते हैं या प्रवाह दर कम कर सकते हैं);
③.कॉलम का तापमान बहुत कम है: ठंडी सर्दियों की सुबह, प्रयोगशाला के हीटिंग के गर्म होने से पहले, कमरे का तापमान बहुत कम होता है, जिससे मोबाइल चरण की चिपचिपाहट बढ़ जाती है। इससे कॉलम दबाव में काफी वृद्धि हो सकती है और मोबाइल चरण के मिश्रण को धीमा कर सकता है। प्रयोग शुरू करने से पहले कमरे के तापमान के स्थिर होने तक प्रतीक्षा करना सबसे अच्छा है।
2. यदि कॉलम का दबाव कम है, तो यह कॉलम के पिछले सिरे और डिटेक्टर के बीच फ्लो सेल में रुकावट का संकेत देता है।
कॉलम को हटा दें, एक टू-वे कनेक्टर जोड़ें, और डिटेक्टर आउटलेट से ट्यूबिंग को डिस्कनेक्ट करें (आउटलेट ट्यूबिंग में रुकावट के कारण ओवरप्रेशर से डिटेक्टर को नुकसान से बचाने के लिए)। यदि दबाव अधिक है, तो फ्लो सेल अवरुद्ध है (कम प्रवाह दर से फ्लश करें); यदि दबाव कम है, तो फ्लो सेल के डाउनस्ट्रीम में वेस्ट लाइन अवरुद्ध है।
II. यदि क्रोमैटोग्राफिक कॉलम को हटाने के बाद भी दबाव अधिक बना रहता है।
1.कॉलम ओवन के ऊपर की ट्यूबिंग को डिस्कनेक्ट करें (कॉलम ओवन के अंदर या कनेक्टिंग ट्यूबिंग में रुकावटों की जांच के लिए);
2.यदि दबाव अधिक बना रहता है, तो इंजेक्टर के ऊपर की ट्यूबिंग को डिस्कनेक्ट करें (इंजेक्टर सुई सीट ट्यूबिंग में रुकावटों की जांच के लिए);
3.यदि दबाव अधिक बना रहता है, तो पर्ज वाल्व के ऊपर की ट्यूबिंग को डिस्कनेक्ट करें (पर्ज वाल्व या ट्यूबिंग में रुकावटों की जांच के लिए)।
4.यदि कॉलम कनेक्ट न होने पर HPLC सिस्टम में दबाव 3 MPa से अधिक हो जाता है, तो यह बहुत संभावना है कि पर्ज वाल्व कोर (फिल्टर तत्व) दूषित हो गया है और उसे बदलने की आवश्यकता है;
5.यदि दबाव अधिक बना रहता है, तो यह पंप/मिक्सर के ऊपर या नीचे की ट्यूबिंग या इन-लाइन फिल्टर में रुकावट का संकेत देता है।
एक बार किसी घटक या ट्यूबिंग अनुभाग में रुकावट की पहचान हो जाने के बाद, उसे बदला या फ्लश किया जा सकता है:
1.यदि रुकावट नमक के अवक्षेपण के कारण हुई है, तो इसे गर्म पानी से फ्लश किया जा सकता है;
2.यदि रुकावट कणों के कारण हुई है, तो अल्ट्रासोनिक सफाई के बाद इसे फ्लश किया जा सकता है;
3.यदि रुकावट नमूना अवक्षेपण के कारण होती है, तो इसे अल्ट्रासोनिक सफाई के बाद एक ऐसे विलायक से फ्लश किया जा सकता है जिसमें नमूना घुलनशील हो।