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तरल क्रोमैटोग्राफी उपकरणों के लिए 20 अलिखित नियम
बना गयी 09.02
**लेखक: मूल रूप से सुश्री ज़ियाओयू लू | HAMAG
लिक्विड क्रोमैटोग्राफी उपकरण भले ही मजबूत दिखते हों, लेकिन वास्तव में वे काफी नाजुक होते हैं। कई खराबियाँ "घिसने" के कारण नहीं, बल्कि "गलत उपयोग" के कारण होती हैं—कुछ परिचालन आदतें जिन्हें हम सामान्य मान लेते हैं, चुपचाप उपकरण का जीवनकाल कम कर रही हैं। निम्नलिखित 20 "अलिखित नियमों" में से प्रत्येक हमसे पहले आए लोगों द्वारा कठिन अनुभव से सीखा गया सबक है।
01-मोबाइल फेज़
1. मोबाइल फेज़ को फ़िल्टर किया जाना चाहिए—0.22 μm या 0.45 μm फ़िल्टर झिल्ली का उपयोग करें; ऐसा न करना पंप को घिसाने के समान है।
2. जलीय चरण में pH मापें—कार्बनिक चरण जोड़ने से पहले इसे समायोजित करें, क्योंकि कार्बनिक चरण इलेक्ट्रोड की रीडिंग में बाधा डालेगा।
3. सही pH रेंज के भीतर बफर लवण का उपयोग करें—प्रत्येक लवण केवल एक विशिष्ट pH रेंज में प्रभावी होता है; इसे गलत तरीके से उपयोग करना समय की बर्बादी है।
4. अकेले अल्ट्रासोनिक डीगैसिंग पर्याप्त नहीं है—इसे वैक्यूम डीगैसर के साथ संयोजन में उपयोग करें, अन्यथा बुलबुले आपकी समझदारी पर सवाल उठाएंगे।
5. ग्रेडिएंट इल्यूशन को 0% कार्बनिक चरण से शुरू न करें—नमक अवक्षेपण और बुलबुले का जोखिम अत्यधिक उच्च है; फॉस्फेट के साथ विशेष सावधानी बरतें। (केवल नमक युक्त प्रणालियों पर लागू होता है।)
02-पंप और वाल्व
6. मोबाइल चरण को कभी सूखने न दें—पंप को सूखा चलाने से प्लंजर और सील रिंग पर सीधा घिसाव होता है, और पंप की मरम्मत महंगी होती है।
7. खारा मोबाइल फेज़ उपयोग करने के तुरंत बाद धोएं—पहले शुद्ध पानी से, फिर मेथनॉल से; नमक के क्रिस्टल पंप को रगड़ने वाले पैड की तरह घिस देंगे।
8. हल्की प्रवाह दर बनाए रखें और हल्के इंजेक्शन करें—अचानक परिवर्तन कॉलम बेड को झटका देते हैं, जिससे पैकिंग को अपूरणीय क्षति होती है।
03-क्रोमैटोग्राफी कॉलम
9. नया कॉलम उपयोग करने से पहले, जांचें कि भंडारण समाधान और मोबाइल फेज़ मिश्रणीय हैं या नहीं—यदि नहीं हैं, तो कॉलम को तुरंत त्याग दें।
10. नमक का उपयोग करने से पहले और बाद में कॉलम को संक्रमण चरण से धोना चाहिए—10% मेथनॉल/पानी से 10 कॉलम वॉल्यूम धोएं; इस चरण को छोड़ने से कॉलम खराब हो जाएगा।
11. कॉलम को बिना सोचे-समझे बैकफ्लश न करें—जब तक मैनुअल में स्पष्ट रूप से अनुमति न दी गई हो, यह कॉलम दक्षता में तेज गिरावट का कारण बनेगा।
12. एक गार्ड कॉलम अवश्य लगाएं—एक छोटा निवेश जो लंबे समय में बहुत बचत करता है; जब यह दूषित हो जाए तो इसे बदल दें।
13. कॉलम को सूखने नहीं देना चाहिए — उपयोग में न होने वाले कॉलम के दोनों सिरों पर कैप को कसकर लगाएं; यदि वे सूख जाते हैं, तो वे बंद हो जाएंगे।
04-नमूने
14. नमूनों को फ़िल्टर किया जाना चाहिए—कणों वाले सभी नमूनों को फ़िल्टर करें; पॉलीसेकेराइड और प्रोटीन के लिए 0.22 μm हाइड्रोफिलिक PTFE फ़िल्टर झिल्ली का उपयोग करें।
15. नमूना विलायक मोबाइल चरण के अनुकूल होना चाहिए—अत्यधिक विलयन क्षमता विलायक प्रभाव उत्पन्न करेगी और खराब शिखर आकार का कारण बनेगी।
05-पद्धति
16. ग्रेडिएंट एल्यूशन से पहले हमेशा एक ब्लैंक चलाएं—अन्यथा, अशुद्धता पीक नमूना पीक के रूप में दिखाई देंगे, जिससे सभी डेटा बेकार हो जाएंगे।
17. मात्रात्मक विधियों में भी अशुद्धता हस्तक्षेप का आकलन करें—किसी भी चीज़ को हल्के में न लें; यह स्थिरता परीक्षण के दौरान आपको परेशान करेगा।
18. विधियों को स्थानांतरित करते समय, उपकरण के डेड वॉल्यूम में अंतर पर ध्यान दें—एक ही विधि विभिन्न उपकरणों पर पूरी तरह से अलग परिणाम दे सकती है।
06-दैनिक आदतें
19. उपकरण की दैनिक 'जांच' के लिए अपनी इंद्रियों का उपयोग करें—असामान्य ध्वनियों को सुनें, बुलबुले देखें, और रिसाव महसूस करें; शीघ्र पहचान का अर्थ है शीघ्र समाधान।
20. केवल क्रोमैटोग्राफिक-ग्रेड अभिकर्मकों का उपयोग करें—विश्लेषणात्मक-ग्रेड अभिकर्मकों में अशुद्धियाँ आपको भूतिया पीक का पीछा करते हुए निराशा में डाल देंगी।
नोट: 90 प्रतिशत एचपीएलसी दोष परिचालन संबंधी आदतों के कारण होते हैं; रोकथाम हमेशा मरम्मत से सस्ती होती है। :)
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