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Consigli per la pulizia e la manutenzione delle fiale per campioni di cromatografia
Creato il 09.18
**Autore: Orgianl da Internet
I vials per campioni di cromatografia sono materiali di consumo essenziali utilizzati per contenere i campioni da analizzare in tecniche come la cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) e la gascromatografia (GC). La loro pulizia influisce direttamente sulla stabilità della linea di base cromatografica, sulla qualità dei picchi e sull'accuratezza dei risultati del test. Se all'interno dei vials rimangono contaminanti o impurità, ciò può facilmente causare problemi come picchi fantasma e deriva della linea di base; pertanto, una corretta pulizia e manutenzione dei vials per campioni di cromatografia è della massima importanza.
I. Preparativi prima della pulizia
Smistamento e classificazione
Ordinare i flaconi dei campioni per materiale (vetro, polipropilene) e dimensione (1,5 mL, 2 mL, ecc.) per evitare graffi o deformazioni causati dal lavaggio insieme di materiali diversi.
Rimuovere eventuali fiale campione rotte, incrinate o con bordi deformati e scartarle immediatamente per prevenire una cattiva sigillatura o contaminazioni residue difficili da rimuovere.
Smontaggio dei materiali di consumo
Separare completamente le fiale campione dai loro tappi e setti. Si consiglia di lavare i setti separatamente o sostituirli direttamente (i setti utilizzati più volte tendono a invecchiare e ad adsorbire impurità).
Se all'interno della fiala sono presenti residui di campione ad alta concentrazione o sostanze poco solubili, versare prima il liquido di scarto e risciacquare preliminarmente la fiala con acqua pura.
II. Metodi di pulizia per diversi livelli di contaminazione
1. Pulizia di routine per contaminazione lieve (adatta a residui di campioni idrosolubili)
Adatta a campioni ordinari utilizzati nei test di routine (ad es. acidi organici, zuccheri, soluzioni di sali inorganici). La procedura è la seguente:
Riempire la fiala per campioni fino a tre quarti del suo volume con acqua pura, sonicare per 5–10 minuti, agitare, quindi scartare il liquido di scarto.
Ripetere la procedura sopra descritta 2–3 volte fino a quando l'acqua scaricata è limpida e priva di impurità visibili.
Infine, risciacquare le pareti interne 2–3 volte con metanolo o acetonitrile di grado cromatografico per rimuovere le tracce di residui organici diversi dalle impurità idrosolubili.
Capovolgere la fiala per campioni su carta da filtro priva di polvere e lasciarla asciugare naturalmente all'aria in una cappa aspirante.
2. Contaminazione moderata (adatta per campioni organici e residui grassi)
Adatta per residui in campioni contenenti solventi organici, grassi, proteine e altre sostanze scarsamente solubili in acqua. La procedura è la seguente:
Per prima cosa, immergere il flacone del campione in etanolo anidro o acetone per 30 minuti per ammorbidire i residui organici.
Eliminare la soluzione di ammollo, aggiungere una quantità appropriata di soluzione detergente neutra acquosa (ad es. una soluzione di detergente liquido al 5%) e sonicare per 15–20 minuti.
Risciacquare ripetutamente le pareti interne della bottiglia con acqua pura fino a quando non rimane più schiuma, assicurandosi che tutti i residui di detergente siano completamente rimossi.
Sciacquare due volte con metanolo di grado cromatografico, poi capovolgere le bottiglie per farle asciugare all'aria o metterle in un forno per asciugarle a bassa temperatura di 40–60 °C (per evitare che le bottiglie di vetro si frantumino a causa delle alte temperature).
3. Contaminazione grave (applicabile a residui di campioni fortemente adsorbenti e difficili da degradare)
Adatto a residui ostinati come residui di pesticidi, antibiotici e sali tampone ad alta concentrazione. La procedura è la seguente:
Preparare una soluzione detergente specializzata: selezionare in base al tipo di contaminante; ad esempio, immergere i contaminanti alcalini in acido nitrico diluito al 5%; immergere i residui organici ostinati in una miscela di metanolo e acido cloridrico al 10%.
Immergere completamente i flaconcini per campioni nella soluzione detergente e lasciare in ammollo per 2–4 ore (oppure sottoporre a pulizia a ultrasuoni per 10 minuti). Fare attenzione a evitare il contatto prolungato tra acidi o alcali forti e flaconcini per campioni in polipropilene.
Rimuovere le fiale campione e sciacquare ripetutamente con acqua pura fino a quando la soluzione non è neutra (verificare con strisce reattive per pH) per garantire che non rimangano residui di soluzione detergente.
Sciacquare in sequenza con etanolo e metanolo di grado cromatografico, quindi asciugare e mettere da parte per l'uso successivo.
Nota: dopo la pulizia con acidi o alcali forti, è essenziale un risciacquo accurato; altrimenti, acidi o alcali residui potrebbero corrodere la colonna cromatografica o influenzare le condizioni di pH durante l'analisi.
III. Asciugatura e conservazione dopo la pulizia
Scelta del metodo di asciugatura
Asciugatura all'aria: adatta per fiale campione in vetro; posizionarle capovolte in un ambiente privo di polvere per evitare che la polvere si depositi all'interno. Questo metodo richiede più tempo ma è meno probabile che danneggi le fiale.
Asciugatura in forno: Mantenere una temperatura di ≤60°C. Assicurarsi che la maggior parte dell'umidità all'interno delle bottiglie sia stata eliminata in precedenza per evitare che il vetro si crepi a causa dell'esposizione improvvisa a calore elevato; l'asciugatura in forno non è raccomandata per le bottiglie campione in polipropilene per evitare deformazioni.
Asciugatura con azoto: Adatta per situazioni urgenti; spurgare rapidamente l'interno delle bottiglie con azoto ad alta purezza. Questo metodo è efficiente e previene la contaminazione secondaria.
Consigli per la conservazione
Una volta pulite e asciugate, le fiale campione devono essere riposte in una scatola di conservazione pulita e con coperchio per prevenire la contaminazione da polvere e aerosol di laboratorio.
I tappi delle fiale e i setti nuovi devono essere conservati separatamente in contenitori sigillati e assemblati solo immediatamente prima dell'uso per evitare che i setti assorbano impurità.
Le fiale campione pulite in lotti diversi devono essere conservate separatamente e chiaramente etichettate; si deve dare priorità all'utilizzo del lotto pulito per primo.
IV. Precauzioni per la manutenzione ordinaria
Evitare la contaminazione incrociata
Utilizzare flaconi per campioni separati per diversi tipi di campioni; ad esempio, i flaconi per campioni utilizzati per i test dei residui di pesticidi non devono essere mescolati con quelli utilizzati per l'analisi nutrizionale degli alimenti.
Le attrezzature per la pulizia (vasche a ultrasuoni, pinze, becher) devono essere pulite regolarmente per evitare che le impurità trasportate dalle attrezzature contaminino i flaconi per campioni.
Manutenzione degli anelli di tenuta e dei tappi
Si consiglia di utilizzare gli anelli di tenuta in silicone una sola volta; dopo ripetute perforazioni, tendono a strapparsi e a perdere particelle, che possono contaminare il campione o ostruire l'ago di iniezione.
Se i tappi a vite si danneggiano o non sigillano correttamente, devono essere sostituiti prontamente per prevenire la volatilizzazione del campione o l'ingresso di contaminanti esterni.
Controlli a campione regolari
Dopo la pulizia, si dovrebbe prelevare una selezione casuale di fiale per campioni, riempirle con solvente bianco (ad es. fase mobile) e analizzarle per verificare la linea di base. Se si rilevano picchi anomali, le fiale devono essere pulite nuovamente.
V. Linee guida per la pulizia
Non utilizzare spazzole a setole rigide o lana d'acciaio per strofinare le pareti interne delle fiale per campioni di cromatografia, poiché ciò potrebbe causare graffi; i contaminanti potrebbero rimanere in questi graffi e essere difficili da rimuovere completamente.
Le fiale per campioni in polipropilene non devono essere esposte a temperature elevate (>60 °C) o a forti agenti ossidanti, per prevenire la deformazione o l'invecchiamento del materiale.
Le fiale per campioni contenenti sostanze altamente tossiche come cianuro o mercurio devono prima essere sottoposte a trattamento di innocuizzazione in conformità con le normative sullo smaltimento dei rifiuti pericolosi prima di essere pulite.
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