液体クロマトグラフィー装置の「暗黙のルール」20選

**著者：小月呂氏（Ms Xiaoyue Lü）によるオリジナル | HAMAG

液体クロマトグラフィー装置は頑丈に見えるかもしれないが、実際には非常に繊細である。多くの故障は「摩耗」によるものではなく、「誤用」によるものである。私たちが当然と思っている操作習慣が、静かに装置の寿命を縮めているのだ。以下の20の「不文律」は、先人たちが苦労して学んだ教訓である。

1. 移動相は濾過する必要がある。0.22 μmまたは0.45 μmのフィルターメンブレンを使用すること。これを怠ると、ポンプを摩耗させるのと同じことになる。

2. 水相のpHを測定する—有機相を加える前に調整すること。有機相が電極の読み取りに干渉するため。

3. 正しいpH範囲の緩衝塩を使用すること—各塩は特定のpH範囲でのみ有効であり、誤って使用すると時間の無駄になる。

4. 超音波脱気だけでは不十分—真空脱気装置と併用すること。そうしないと、気泡のせいで気が狂いそうになる。

5. グラジエント溶出を有機相0%から開始しないこと—塩の析出や気泡のリスクが非常に高く、リン酸塩には特に注意すること。（塩を含む系にのみ適用。）

6. 移動相を空にしないこと—ポンプを空運転するとプランジャーとシールリングが直接摩耗し、ポンプの修理は高額になる。

7. 生理食塩水移動相を使用した後は、すぐに洗浄してください。まず純水で、次にメタノールで洗浄します。塩の結晶は、研磨剤のようにポンプを摩耗させます。

8. 流量は穏やかに保ち、注入も穏やかに行ってください。急激な変化はカラムベッドに衝撃を与え、充填剤に不可逆的な損傷を与えます。

9. 新しいカラムを使用する前に、保存液と移動相が混和するかどうかを確認してください。混和しない場合は、すぐにカラムを廃棄してください。

10. カラムは、塩を使用する前と後の両方で、遷移相で洗浄する必要があります。10%メタノール/水でカラム容量の10倍量洗浄してください。この手順を省略すると、カラムが損傷します。

11. カラムを無差別に逆流洗浄しないでください。マニュアルで明示的に許可されていない限り、カラム効率の急激な低下を引き起こします。

12. ガードカラムを取り付ける必要があります。小さな投資で、長期的には大きな節約になります。汚染されたら交換してください。

13. カラムを乾燥させてはならない。使用しないカラムは、両端にキャップをしっかりと締めること。乾燥すると、目詰まりを起こす可能性がある。

14. サンプルは濾過する必要がある。粒子を含むすべてのサンプルは濾過すること。多糖類やタンパク質には、0.22 μmの親水性PTFEフィルターメンブレンを使用すること。

15. サンプル溶媒は移動相と適合性がある必要があります—溶出力が過剰だと溶媒効果を引き起こし、ピーク形状が不良になります。

16. グラジエント溶出の前に必ずブランクを流すこと。そうしないと、不純物ピークがサンプルピークに紛れて、すべてのデータが無駄になる。

17. 定量方法でも不純物の干渉を評価すること。何も当然と思わないこと。さもないと安定性試験の際に必ずしっぺ返しを食う。

18. メソッドを移管する際は、装置のデッドボリュームの違いに注意すること。同じメソッドでも、装置が異なれば全く異なる結果になることがある。

19. 五感を使って毎日装置を「点検」すること。異常な音に耳を澄まし、気泡に目を配り、漏れを手で確認する。早期発見が早期解決につながる。

20. クロマトグラフ用試薬のみを使用すること。分析用試薬の不純物は、幻のピークを追いかけるうちに絶望へと追い込むことになる。