액체 크로마토그래피 장비를 위한 20가지 암묵적 규칙

**저자: Ms Xiaoyue Lü 원작 | HAMAG

액체 크로마토그래피 장비는 견고해 보일 수 있지만 실제로는 매우 민감합니다. 많은 고장은 '마모'가 아니라 '오용'으로 인해 발생합니다. 우리가 당연하게 여기는 특정 작동 습관이 조용히 장비의 수명을 단축시키고 있습니다. 다음의 20가지 '암묵적 규칙'은 선배들이 값비싼 교훈을 통해 얻은 경험입니다.

1. 이동상은 반드시 여과해야 합니다. 0.22 μm 또는 0.45 μm 여과막을 사용하며, 여과하지 않으면 펌프를 마모시키는 것과 같습니다.

2. 수성 상의 pH를 측정하십시오—유기 상을 첨가하기 전에 조정하십시오, 유기 상이 전극 판독을 방해할 수 있기 때문입니다.

3. 올바른 pH 범위 내에서 완충 염을 사용하십시오—각 염은 특정 pH 범위에서만 효과적입니다; 잘못 사용하면 시간 낭비입니다.

4. 초음파 탈기만으로는 충분하지 않습니다—진공 탈기기와 함께 사용하십시오, 그렇지 않으면 기포 때문에 정신이 혼미해질 수 있습니다.

5. 구배 용리를 0% 유기 상에서 시작하지 마십시오—염 침전 및 기포 발생 위험이 매우 높습니다; 인산염에 특히 주의하십시오. (염을 포함하는 시스템에만 적용됩니다.)

6. 이동상을 완전히 비우지 마십시오—펌프를 건조 상태로 작동하면 플런저와 씰 링이 직접 마모되며, 펌프 수리는 비용이 많이 듭니다.

7. 염류 이동상을 사용한 후에는 즉시 세척하십시오—먼저 순수한 물로, 그 다음 메탄올로 세척하십시오; 염 결정은 수세미처럼 펌프를 마모시킵니다.

8. 완만한 유속을 유지하고 부드럽게 주입하십시오—갑작스러운 변화는 컬럼 베드를 충격하여 충전재에 돌이킬 수 없는 손상을 초래합니다.

9. 새 컬럼을 사용하기 전에 보관 용액과 이동상이 혼화 가능한지 확인하십시오—혼화되지 않으면 즉시 컬럼을 폐기하십시오.

10. 염을 사용하기 전후에 컬럼을 전이상으로 세척해야 합니다—10% 메탄올/물로 컬럼 부피의 10배만큼 세척하십시오; 이 단계를 건너뛰면 컬럼이 손상됩니다.

11. 컬럼을 무분별하게 역세척하지 마십시오—매뉴얼에 명시적으로 허용되지 않는 한, 이는 컬럼 효율의 급격한 저하를 초래합니다.

12. 가드 컬럼을 반드시 장착하십시오—작은 투자가 장기적으로 많은 비용을 절약합니다; 오염되면 교체하십시오.

13. 컬럼이 마르지 않도록 해야 합니다. 사용하지 않는 컬럼은 양쪽 끝의 캡을 단단히 조여 주십시오. 컬럼이 마르면 막힐 수 있습니다.

14. 시료는 여과해야 합니다. 입자가 포함된 모든 시료는 여과하며, 다당류와 단백질의 경우 0.22 μm 친수성 PTFE 여과막을 사용하십시오.

15. 시료 용매는 이동상과 호환되어야 합니다—과도한 용리 능력은 용매 효과를 유발하여 피크 모양이 불량해질 수 있습니다.

16. 기울기 용출 전에는 항상 블랭크를 실행하세요. 그렇지 않으면 불순물 피크가 시료 피크로 위장하여 모든 데이터가 무용지물이 됩니다.

17. 정량 분석 방법에서도 불순물 간섭을 평가하세요. 아무것도 당연하게 여기지 마세요. 안정성 시험 중에 반드시 문제가 되어 돌아옵니다.

18. 방법을 이전할 때는 기기 사강 용적(dead volume)의 차이에 주의하세요. 동일한 방법이라도 기기가 다르면 완전히 다른 결과가 나올 수 있습니다.

19. 매일 감각을 이용해 기기를 '점검'하세요. 이상한 소리를 듣고, 기포를 관찰하며, 누출을 느껴보세요. 조기 발견이 조기 해결을 의미합니다.

20. 크로마토그래피용 등급 시약만 사용하세요. 분석용 등급 시약의 불순물은 유령 피크를 쫓다가 절망에 빠지게 만듭니다.