Русский
Множественные факторы, влияющие на срок службы хроматографической колонки, и их решения
Создано 05.14
**Информация собрана из Интернета
Срок службы хроматографической колонки вызывает значительную обеспокоенность, поскольку он напрямую связан с затратами. Какие факторы влияют на продолжительность срока службы колонки? Существуют ли методы продления этого срока службы?
Возможные способствующие факторы
① Хроматографические условия относительно экстремальны
② Колонка демонстрирует низкую устойчивость
③ Образец относительно загрязнен
④ Защитные меры не были приняты
1. Хроматографические условия относительно экстремальны
Хроматографические условия считаются экстремальными, когда:
① Подвижная фаза имеет чрезмерно экстремальное значение pH;
② Концентрация буферной соли в подвижной фазе чрезмерно высока;
③ Давление в колонне чрезмерно высоко;
④ Температура в колонне чрезмерно высока.
1. Стандартные колонки на основе кремнезема обычно выдерживают значения pH от 2 до 6. Ниже pH 2 связанная фаза может гидролизоваться и отсоединяться; выше pH 7 кремнеземная упаковка может растворяться и вымываться.
Решение: Для экстремальных требований к pH используйте органические гибридные колонки с широкой терпимостью к pH.
2. Чрезмерно высокая концентрация буферной соли в подвижной фазе:
① Механические примеси в буферных солях также могут быть повышены; требуется мембранная фильтрация буферных солей.
② При высоких концентрациях соли в буфере чрезмерная доля органической фазы в градиентах может вызвать осаждение соли, блокируя смесители, инжекторы, колонки и трубки.
Решение: Избегайте чрезмерной доли органической фазы или добавьте 20% воды в органическую фазу.
3. Высокое давление в колонке из-за высокой вязкости подвижной фазы:
Высоковязкие растворители: например, изопропанол, этанол, диоксан, смеси метанола и воды
Решение: 1) Переключитесь на подвижную фазу с более низкой вязкостью; 2) Уменьшите скорость потока; 3) Соответствующим образом увеличьте температуру колонки;
4. Производители, как правило, рекомендуют температуру колонки ниже 50°C, поскольку чрезмерное тепло может сократить срок службы колонки.
Решение: Используйте органогибридные колонки для повышения термостойкости.
2. Проблемы с допустимыми пределами колонки
1. Органические гибридные колонки, как упоминалось ранее, демонстрируют превосходную устойчивость к колебаниям pH окружающей среды и температуры.
2. Микропористые структуры в кремнеземных матрицах, подобные зубным фиссурам, легко вызывают удержание образца или мертвую адсорбцию.
Решение: Применение специализированных методов для минимизации микропористости значительно продлевает срок службы колонки.
3. Колонки с меньшим размером частиц более подвержены повышенному давлению в колонке
Решение: Используйте высокоэффективные колонки с сердцевинно-оболочечной структурой. Колонки с сердцевинно-оболочечной структурой большего размера частиц демонстрируют минимальное снижение эффективности, предлагая при этом большую устойчивость к увеличению давления, вызванному загрязнением.
3. Образец загрязнен
Мы должны понять происхождение образца — является ли он экстрактом природного продукта, биологическим образцом, продуктом ферментации или синтетическим соединением. Для экстрактов природных продуктов наша подготовительная работа включает обогащение целевого соединения на основе его свойств, удаляя загрязнители, такие как пигменты, которые могут загрязнять колонку. Для биологических образцов, которые могут происходить из тканей, крови и т.д.
мы должны устранить компоненты, вызывающие загрязнение колонки, такие как фосфолипиды и белки, одновременно обогащая целевые компоненты с низкой концентрацией. Для продуктов ферментации необходимо удалить питательные вещества, такие как сахара в ферментационном бульоне, и компоненты из разрушенных микробных клеток, в то время как целевые компоненты с низкой концентрацией обогащаются. Для синтетических продуктов мы должны идентифицировать остаточные компоненты, побочные продукты и избыточные сырьевые материалы в реакционном растворе, соответствующим образом удаляя компоненты, загрязняющие колонку.
Решения: ① Используйте методы экстракции растворителем или осаждения для удаления примесей или обогащения; ② Для небольших объемов образцов используйте экстракцию в твердой фазе (SPE) для подготовки образцов; ③ Для больших объемов образцов используйте колонки большего размера для адсорбции примесей или обогащения целевых соединений.
4. Защита передней части колонки
Источники загрязнения колонок: ① Происходящие из образца; ② Происходящие из подвижной фазы.
Решения: 1) Установите онлайн-фильтр перед инжектором, чтобы предотвратить попадание загрязняющих веществ из подвижной фазы в колонку;
2) Установите защитную колонку перед основной колонкой, чтобы предотвратить попадание загрязняющих веществ, таких как сильно удерживаемые вещества в образце, в колонку, а также обеспечить вторичную защиту от загрязняющих веществ в подвижной фазе.
Contact
Leave your information and we will contact you.
телефон