20 Quy Tắc Bất Thành Văn cho Thiết Bị Sắc Ký Lỏng

**Tác giả: Nguyên gốc từ Ms Xiaoyue Lü | HAMAG

Thiết bị sắc ký lỏng trông có vẻ bền bỉ, nhưng thực tế chúng khá mỏng manh. Nhiều sự cố không phải do "hao mòn" mà do "sử dụng sai" — một số thói quen vận hành mà chúng ta coi là hiển nhiên đang âm thầm rút ngắn tuổi thọ của thiết bị. Mỗi một trong 20 "quy tắc bất thành văn" sau đây đại diện cho một bài học xương máu mà những người đi trước đã trải qua.

1. Pha động phải được lọc — sử dụng màng lọc 0,22 μm hoặc 0,45 μm; nếu không làm vậy, điều đó tương đương với việc làm mòn bơm.

2. Đo pH trong pha nước—điều chỉnh trước khi thêm pha hữu cơ, vì pha hữu cơ sẽ gây nhiễu cho chỉ số điện cực.

3. Sử dụng muối đệm trong đúng khoảng pH—mỗi loại muối chỉ hiệu quả trong một khoảng pH cụ thể; dùng sai sẽ lãng phí thời gian.

4. Chỉ siêu âm khử khí là chưa đủ—hãy kết hợp với thiết bị khử khí chân không, nếu không bọt khí sẽ khiến bạn nghi ngờ chính mình.

5. Không bắt đầu gradient rửa giải ở 0% pha hữu cơ—nguy cơ kết tủa muối và tạo bọt là rất cao; đặc biệt cẩn thận với phosphate. (Chỉ áp dụng cho hệ thống chứa muối.)

6. Không bao giờ để pha động chạy cạn—bơm chạy khô gây mài mòn trực tiếp pít-tông và vòng đệm, và việc sửa bơm rất tốn kém.

7. Rửa ngay sau khi sử dụng pha động chứa muối—đầu tiên bằng nước tinh khiết, sau đó bằng methanol; tinh thể muối sẽ mài mòn bơm như miếng chà rửa.

8. Duy trì tốc độ dòng chảy nhẹ nhàng và thực hiện tiêm mẫu nhẹ nhàng—thay đổi đột ngột gây sốc cho cột, dẫn đến hư hỏng không thể phục hồi cho vật liệu nhồi.

9. Trước khi sử dụng cột mới, kiểm tra xem dung dịch bảo quản và pha động có trộn lẫn được không—nếu không, hãy loại bỏ cột ngay lập tức.

10. Cột phải được rửa bằng pha chuyển tiếp cả trước và sau khi sử dụng muối—rửa bằng 10% methanol/nước với 10 thể tích cột; bỏ qua bước này sẽ làm hỏng cột.

11. Không rửa ngược cột một cách bừa bãi—trừ khi được cho phép rõ ràng trong tài liệu hướng dẫn, điều này sẽ gây ra sự suy giảm nghiêm trọng về hiệu suất cột.

12. Phải lắp cột bảo vệ—một khoản đầu tư nhỏ giúp tiết kiệm lớn về lâu dài; thay thế khi nó bị nhiễm bẩn.

13. Không được để cột bị khô — đối với các cột không sử dụng, hãy vặn chặt nắp vào cả hai đầu; nếu chúng bị khô, chúng sẽ bị tắc.

14. Mẫu phải được lọc — lọc tất cả các mẫu có chứa hạt; sử dụng màng lọc PTFE ưa nước 0,22 μm cho polysaccharide và protein.

15. Dung môi mẫu phải tương thích với pha động—khả năng rửa giải quá mức sẽ gây ra hiệu ứng dung môi và dẫn đến hình dạng đỉnh kém.

16. Luôn chạy mẫu trắng trước khi rửa giải gradient—nếu không, các đỉnh tạp chất sẽ giả dạng thành đỉnh mẫu, khiến toàn bộ dữ liệu trở nên vô dụng.

17. Đánh giá nhiễu tạp chất trong các phương pháp định lượng nữa—đừng coi bất cứ điều gì là hiển nhiên; điều đó sẽ quay lại ám ảnh bạn trong quá trình kiểm tra độ ổn định.

18. Khi chuyển phương pháp, hãy chú ý đến sự khác biệt về thể tích chết của thiết bị—cùng một phương pháp có thể cho kết quả hoàn toàn khác nhau trên các thiết bị khác nhau.

19. Sử dụng giác quan của bạn để 'kiểm tra' thiết bị hàng ngày—lắng nghe âm thanh bất thường, quan sát bọt khí, và cảm nhận rò rỉ; phát hiện sớm nghĩa là xử lý sớm.

20. Chỉ sử dụng hóa chất cấp độ sắc ký—tạp chất trong hóa chất cấp độ phân tích sẽ khiến bạn tuyệt vọng khi truy tìm các đỉnh ma.